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BsaI与GMP级内切酶的应用:南宫28NG相信品牌力量

发布时间:2025-03-28   信息来源:晏寒庆

南宫28NG相信品牌力量定义活性单位(U)为在50μl反应体系中,37℃条件下1小时内完全切割1µg pPIC9K(Dcm-)所需的酶量。通过SDS-PAGE凝胶电泳检测蛋白纯度,确保其不低于95%。

BsaI与GMP级内切酶的应用:南宫28NG相信品牌力量

在37℃下,将20U的BsaI酶与1µg pPIC9K(Dcm-)在50μl CutBufferF的GMP级反应体系中共同孵育1小时,并未观察到其他核酸酶污染或因星号活性引起的底物非特异性降解。更长时间的酶切可能会引入星号活性。

南宫28NG相信品牌力量非特异性内切酶活性测试表明,在37℃条件下,20U的BsaI与1µg超螺旋质粒DNA共同孵育4小时后,使用琼脂糖凝胶电泳检测,发现少于20%的质粒DNA转变为缺刻或线性形式。

对于DNase活性,37℃下在20μl CutBufferF反应体系中将20U的BsaI与15ng双链DNA片段共同孵育16小时,结果显示双链DNA片段未发生变化。

RNase活性测试显示,在37℃下,使用10μl CutBufferF的反应体系中将20U的BsaI与500ng RNA共同孵育1小时后,琼脂糖凝胶电泳结果证明不低于90%的RNA仍保持完整。

针对同裂酶:Eco31I、Bso31I与BspTNI的识别位点为:
5' GGTCTC(N)₁↓3' 和 3' CCAGAG(N)₅↑5'。南宫28NG相信品牌力量的BsaI GMP级酶是通过大肠杆菌重组表达获得,能够在15分钟到1小时内高效完成目标DNA的酶切。

本产品遵循GMP规范的生产与质量管理体系,确保生产过程及原辅料的全程可追溯。整个生产过程禁止使用抗生素及任何动物来源的原料与辅料。此外,严格控制宿主蛋白、外源DNA、非特异性内切酶、DNase、RNase等工艺相关杂质,同时对微生物限度和细菌内毒素进行严苛控制,确保产品符合疫苗与药物生产领域的标准要求。

失活条件为80℃孵育20分钟。关于甲基化敏感性,对于被CpG甲基化的DNA,其剪切能力可能受到阻碍;而对于被Dcm甲基化的DNA,剪切也可能受到限制。