酶联免疫法（ELISA）是通过抗体与抗原反应来检测目标物质的有效技术。其核心步骤包括：包被抗体、添加样本、进行酶标记以及显色反应。该方法的灵敏度可以达到0.1 ng/mL，广泛应用于疾病诊断和食品安全检测等关键领域。

在样本准备方面，对于血清样本，需通过离心去除纤维蛋白，而细胞培养的上清液则建议使用0.22 μm滤膜进行过滤，以去除杂质。实用技巧提示：在冻存样本检测前，应先在37℃下复温约30分钟，以确保最佳的检测效果。

关于试剂盒的选择，以下为显色避坑指南：

• 问：ELISA检测需要多少样本量？
  答：通常需要50-100 μL血清，且细胞上清建议浓缩2-5倍。
• 问：如何避免假阳性？
  答：在封闭时建议使用5% BSA溶液，并确保洗涤液中含有0.05% Tween-20。
• 问：国产与进口试剂盒差异大吗？
  答：核心靶标建议选用进口试剂盒（如R&D Systems），而常规指标的国产试剂盒（如碧云天）则性价比更高。

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